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Willkommen auf der Novus Visuelle Protocol Series.
In diesem Video erfahren Sie, wie Sie alle Phasen des florescent durchführen
Immunzytochemie mit den gängigsten Methoden für diesen Test.
Vor dem Start der ICC Verfahren
werden wir zeigen, wie man Deckgläser und Zellkultur-Platten vorzubereiten
gefolgt von der Beschichtung von unseren Zellen.
Wir beginnen mit der Säurebehandlung neue Deckgläser in einem Backenzahn Salzsäure für
24 Stunden.
Nach sorgfältiger Abdekantieren der Säure und Entfernen der Deckgläser,
waschen wir jeweils mit destilliertem Wasser,
dann ein Finale mit Ethanol spülen.
Als optionalen Schritt können Sie die Deckgläschen in eine Unterschicht Rack versenken platzieren
in einer 0,1 mg / ml Lösung Gelatine oder Polylysin
für fünf Minuten.
Diese Beschichtungen aide in zusätzliche Adhärenz von Zellen, um das
Deckgläser sicherzustellen, dass sie nicht während der späteren Waschschritte abgetrennt.
Nach der Behandlung entfernen Sie die Unterschicht Rack und trocknen Sie die Deckgläser in der Kultur
Haube oder ein beheizter Ofen.
Saubere, trockene Deckgläser werden dann in jede Vertiefung einer sechs gut Kultur eingeführt
Platte
und mit einem Deckel bedeckt.
Um Zeit zu sparen, können große Mengen an Platten vor der Zeit für eine spätere Verwendung vorbereitet werden.
Die Platten können auch, indem sie unter der Haube ist UV-Licht sterilisiert werden.
Mit sauberen Deckgläser in sechs Well-Platten hergestellt werden, können wir nun hinzufügen, unsere Zellen.
Hier in Zellen platted hinzuzufügen eine Dichte von einer halben Million Zellen pro Vertiefung.
Die Zellen werden dann über Nacht im Brutschrank kultiviert oder bis sie die gewünschte
Dichte.